聚丙烯酰胺凝膠電泳的用途

 聚丙烯酰胺凝膠電泳的用途： 在制膠前應(yīng)準(zhǔn)備玻璃板、垂直平板支架的安裝、密封好得玻璃板。

1.  首先用洗滌劑將玻璃板反復(fù)清洗干凈，待玻璃板晾干后，再將1mm塑料薄片沾少許清水，然后使其貼在玻璃板上，然后將另一塊凹行玻璃板與原玻璃板緊貼在一起。
2. 再把貼好的玻璃板，然后放入垂直支架內(nèi)側(cè)，兩側(cè)用鋼夾固定好，鋼夾的高度不能超過凹行玻璃的凹口處為準(zhǔn)，兩側(cè)選用力度對稱、大小適中的鋼夾。
3. 將1%的瓊脂糖加熱融化后，倒入支架板底槽中，然后將其密封起來，再使用容器吸取少量瓊脂溶液，加入到玻璃板兩邊的縫隙內(nèi)側(cè)，將其密封，冷卻凝固后作為備用。 用30%的 丙烯酰胺溶液10ml；10ｘTBE溶液4ml；雙蒸水16ml；20%的過硫酸銨（AP）200ul；TEMED溶液20ul配制PAGE凝膠。 把垂直支架傾斜30°，將配好的名為PAGE的凝膠溶液沿凹形玻璃平口處緩緩倒入至距平口7mm處為準(zhǔn)，灌膠完成后，用槍吸取少量水密封膠口，壓平膠面即可，后續(xù)可以開始點(diǎn)樣電泳。 用微量移液器吸取1ul的溴酚藍(lán)溶液，根據(jù)PCR產(chǎn)物量大小吸取適量樣品，點(diǎn)入膠孔內(nèi)即可。點(diǎn)樣結(jié)束后，即可接通電源，調(diào)節(jié)電壓至300V，90min，電泳時(shí)間根據(jù)PCR產(chǎn)物分子量可適當(dāng)延長。